Instrumento de secuencia de Sanger

La secuenciación de Sanger, que se utilizó para la secuenciación de nucleótidos de ADN, fue creada y recompensada por el Premio Nobel por Frederick Sanger en 1977.
¿Cómo funciona la secuenciación de Sanger?
En primer lugar, usamos el cebador para tener una unión de cebador corto junto a la región de interés en la plantilla de ADN. Luego, la ADN polimerasa comienza a acumularse desde el cebador agregando nucleótidos complementarios a la cadena de ADN.
Para encontrar la parada que nos permite identificar la base del mismo final del fragmento de ADN particular. El principio de secuenciación de Sanger se aplica para eliminar un átomo de oxígeno del ribonucleótido. DDNTP (Dideoxinucleótido) es poner una llave en un engranaje. La enzima polimerasa ya no agregará nucleótidos normales a esta cadena de ADN. La extensión se detendría.
Podemos identificar la cadena que termina el nucleótido por un tinte fluorescente específico. Superyears Genetic Analyzer puede soportar el tinte fluorescente de hasta 6/8 colores para ser exactos.
La secuenciación de Sanger da como resultado la formación de productos de extensión de varias longitudes terminadas con dideoxinucleótidos en el extremo 3 '.
La electroforesis capilar separa los productos de extensión.
Una corriente eléctrica inyecta las moléculas en un tubo capilar largo lleno de un polímero en gel.
Durante CE (electroforesis capilar), los fragmentos de ADN cargados negativamente avanzan hacia el electrodo positivo.
La velocidad a la que un fragmento de ADN migra a través del medio es inversamente proporcional a su peso molecular.
Este proceso puede separar los productos de extensión por tamaño a una resolución de una base.
Un láser excita los fragmentos de ADN marcados con tinte mientras pasan a través de una pequeña ventana al final del capilar.
El tinte excitado emite luz en una longitud de onda característica que es detectada por un sensor de luz.
El software puede interpretar la señal detectada y traducirla en una base.
Se realiza una reacción de secuenciación en presencia de los cuatro nucleótidos terminados, un conjunto de fragmentos de ADN que se miden y separan la base por base.
Archivo de datos que muestra la secuencia del ADN en un electroferograma colorido.

Basado en el principio de secuenciación de Sanger, el analizador de genes producido por el gen Superyears se puede utilizar para el análisis de secuencia de genes y el análisis de fragmentos, que pueden detectar rápidamente los genes de objetivos múltiples (10-70 loci) a la vez. La generación El analizador ETic tiene las ventajas de bajo costo de detección única, operación simple e interpretación intuitiva y directa de resultados. Es una herramienta poderosa para la inspección de unión de nivel medio y múltiples genes.

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