Detalles de la compañía

Nanjing Superyears Gene Technology Co., Ltd. [Jiangsu,China] Tipo de Negocio:Fabricante , Servicio , Compañía de comercio Principales Mercados: África , Asia , Europa del este , Europa , medio Este , norte de Europa , Europa occidental , En todo el mundo Exportador:41% - 50% certs:ISO13485, ISO14001, ISO9001, CE, MSDS, FSC, CCC, EMC, Test Report

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El uso de una PCR de PCR en tiempo real de PCR de Termociclador de 5 canales

2023-07-17

Real Time Pcr

El uso de una PCR QPCR en tiempo real de PCR de Termociclador de 5 canales implica los siguientes pasos:

1. Preparación de la muestra: extraer ADN o ARN de la muestra biológica de interés. Esto se puede hacer utilizando varios métodos, como la extracción con fenol-cloroformo, la purificación basada en columnas o la purificación magnética basada en cuentas.
2. Diseño de imprimación y sonda: diseñe cebadores y sondas específicos que se unan a la secuencia objetivo de interés. Estos cebadores y sondas generalmente se diseñan utilizando herramientas de software que consideran factores como la temperatura de fusión, el contenido de GC y la especificidad.
3. Configuración de reacción de PCR: Prepare la mezcla de reacción de PCR combinando la plantilla de ADN o ARN, cebadores, sondas y otros componentes necesarios como nucleótidos, tampón y polimerasa. La mezcla de reacción se distribuye en los pozos de la placa de PCR.
4. Termociclamamiento: coloque la placa de PCR en el termociclador de 5 canales, que puede acomodar múltiples muestras simultáneamente. El termociclador pasará por una serie de ciclos de temperatura, que incluyen desnaturalización, recocido y extensión, para amplificar la secuencia de ADN o ARN objetivo.
5. Monitoreo en tiempo real: el termociclador de 5 canales está equipado con capacidades de detección de fluorescencia. Durante cada ciclo de temperatura, el termociclador detecta la fluorescencia emitida por la sonda marcada a medida que se une al ADN o ARN amplificado. Esto permite el monitoreo en tiempo real del proceso de amplificación.
6. Análisis de datos: los datos de fluorescencia en tiempo real se recopilan y analizan utilizando software especializado. El software calcula el valor del umbral del ciclo (CT), que representa el número de ciclo en el que la señal de fluorescencia cruza un umbral predefinido. El valor de CT se usa para cuantificar la cantidad inicial de ADN o ARN objetivo en la muestra.
7. Interpretación de datos: los valores de CT obtenidos del termociclador de 5 canales se pueden comparar entre diferentes muestras o condiciones experimentales. Esto permite la cuantificación de los niveles de expresión génica, la detección de mutaciones específicas o variaciones genéticas, o medición de la carga viral, entre otras aplicaciones.
En general, la PCR QPCR en tiempo real del termociclador de 5 canales es una herramienta poderosa para varias aplicaciones de biología molecular, que proporciona una cuantificación rápida y precisa de los ácidos nucleicos.

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