Análisis de instrumentos de análisis clínico médico analizador de genes

Análisis de instrumentos de análisis clínico médico analizador de genes

Descripción del analizador genético

El método MLPA (amplificación de la sonda dependiente de la ligadura multiplex) detecta múltiples cambios de número de copias de genes o sitios loci. Hoy en día, MLPA se usa para verificar grandes cantidades de trastornos hereditarios y perfiles de tumores. Desde que el científico holandés Jan Schouten lo inventó por primera vez, el método MLPA se publicó por primera vez en 2002 'Investigación de ácidos nucleicos'. El principio de la MLPA es aplicar el diseño de sonda específico dirigido a una región de interés en cada ADN de muestra. El método MLPA consiste en los siguientes pasos:

Denaturación> Ligación de hibridación> PCR MLPA Amplificons> Electroforesis capilar> Análisis de datos

Utilizamos ADN de muestra colocado en el termociclador para separar las hebras de ADN. Luego, la cadena de ADN dirigida se hibridará agregando los oligonucleótidos de sonda izquierda y derecha. La enzima ligasa se unirá a la sonda oligos inmediatamente al objetivo adyacente en el ADN de la muestra. Por lo tanto, la sonda hibridada izquierda y derecha oligo comienza a catalizar la creación de un enlace covalente en el medio. Una vez que los oligos de la sonda están sellados, las sondas MLPA se amplificarán exponencialmente usando el par de cebadores de PCR único.

La reacción de PCR consiste en los tres pasos: desnaturalización, recocido de cebadores y alargamiento del cebador. Esos pasos de amplificación por PCR se repiten muchas veces. El cebador marcado con fluorescencia se incorpora al tamaño de los productos de amplificación que pasarán por la electroforesis capilar para pasar un detector. La fluorescencia medida se visualiza como un patrón máximo, el llamado electroferograma. Los datos sin procesar del analizador de electroforesis capilar forman la entrada del análisis MLPA.

Visualización del analizador de ADN