Electroforesis capilar del analizador genético para MLPA
Descripción del analizador de ADN
El método MLPA (amplificación de la sonda dependiente de la ligadura multiplex) detecta múltiples cambios de número de copias de genes o sitios loci. Hoy en día, MLPA se usa para verificar grandes cantidades de trastornos hereditarios y perfiles de tumores. Desde que el científico holandés Jan Schouten lo inventó por primera vez, el método MLPA se publicó por primera vez en 2002 '' Investigación de ácidos nucleicos ' . El principio de la MLPA es aplicar el diseño de sonda específico dirigido a una región de interés en cada ADN de muestra. El método MLPA consiste en los siguientes pasos:
Denaturación> Ligación de hibridación > PCR MLPA Amplificons Electroforesis capilar> Análisis de datos
Utilizamos ADN de muestra colocado en el termociclador para separar las hebras de ADN. Luego, la cadena de ADN dirigida se hibridará agregando los oligonucleótidos de sonda izquierda y derecha. La enzima ligasa se unirá a la sonda oligos inmediatamente al objetivo adyacente en el ADN de la muestra. Por lo tanto, la sonda hibridada izquierda y derecha oligo comienza a catalizar la creación de un enlace covalente en el medio. Una vez que los oligos de la sonda están sellados, las sondas MLPA se amplificarán exponencialmente usando el par de cebadores de PCR único.
La reacción de PCR consiste en los tres pasos: desnaturalización, recocido de cebadores y alargamiento del cebador. Esos pasos de amplificación por PCR se repiten muchas veces. Los cebadores marcados con fluorescencia, que pasarán por la electroforesis capilar para pasar un detector, se incorporan al tamaño de los productos de amplificación. La fluorescencia medida se visualizó como un patrón máximo, el llamado electroferograma. Los datos sin procesar del analizador de electroforesis capilar forman la entrada del análisis MLPA.
Los analizadores genéticos del gen Superyears pueden usarse no solo para la secuenciación de Sanger sino también para el análisis de fragmentos. Análisis de fragmentos Primero, obtiene los fragmentos de ADN marcados con fluorescencia, realiza la electroforesis capilar utilizando un analizador genético y compara el estándar de tamaño relativo de la muestra con los marcadores estándar diseñados a través del software de análisis.
El analizador genético del gen Superyears se puede utilizar en la electroforesis capilar durante el proceso del experimento MLPA, y los datos obtenidos pueden usarse para el software de análisis profesional (compatible).
Los siguientes electroferogramas ilustran las muestras dirigidas en comparación con un conjunto de muestras de referencia y relaciones de sonda de cada muestra en un gráfico de relación. El uso del analizador genético de Gene Superyears para la aplicación MLPA para analizar la atrofia muscular espinal y sus resultados se pueden visualizar. Además, también se puede presentar el rendimiento clásico de la serie 116 de MLPA.
Caso 1. Atrofia muscular espinal (SMA)
Ventajas de MLPA
La tecnología MLPA combina muchas características de la hibridación de la sonda de ADN, la tecnología de PCR y la electroforesis capilar, y desarrolla su característica dependiente de la ligadura.
Ventajas del analizador de fragmentos de ADN
1. Basado en el método Sanger, rendimiento sobresaliente del estándar de oro;
2.Pupporta hasta 8 colores fluorescencia, detección única para más de 70 sitios;
3. Alta resolución, alta repetibilidad y excelente calidad de secuenciación;
4. Plataforma de detección abierta, compatible con kits comerciales en el mercado;
5. Interfaz de lenguaje personalizable, cargo gratuito de actualización de software;
6. rendimiento de alto costo, ahorrando más del 50%de costo en materiales y reactivos de los consumibles;
7. Certificado por la Administración Nacional de Productos Médicos de China ( NMPA) y CE, asegurando el diagnóstico in vitro (IVD) aplicable ;
8. Soporte técnico perfecto y servicios posteriores a la venta, un año de garantía gratuita;
Aplicación automática de analizador de genes
MLPA se puede aplicar a:
1. Detectar reordenamientos menores: BRCA1, BRCA2, MSH2, etc.
2. Detectar una amplia gama de reordenamientos cromosómicos: síndrome de Williams, síndrome de Prill/Angelman, etc.
3. Detección de cambios de número de copias en regiones subteloméricas.
5. Diagnóstico tumoral: cambios de número de copias en todos, CLL, oligodendrogliomas, melanomas, neuroblastomas y otras enfermedades.
6. Detección cuantitativa de metilación: Praderill. Síndrome de Angelman, Fragilex et al.
7. Análisis de ARNm de apoptosis y respuesta inflamatoria.
Toda la información aumentó el 12/mayo/2022 por el equipo de marketing de Superyears Co.
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